Post by alamin447 on Aug 3, 2023 0:30:54 GMT -5
苯中脱蜡并化。然后将切片放入高压锅（17.5 PSI，122 °C；Biocare Decloaking Chamber，Biocare Medical）中，加入 0.01 M 柠檬酸钠缓冲液（pH 6.0）或 0.1 M Tris-HCl 缓冲液（pH 9.0），持续 10 分钟，分别用于 RRM2 和 TFR 抗原的热抗原修复。室温下用 3% 过氧化氢淬灭内源过氧化物酶。原代山羊抗人 R2 多克隆抗体（sc-10846；Santa Cruz Biotechno
logy），-1 (1:200)。小鼠抗人 TFR 单克隆 IgG1 Telegram 用户号码列表抗体（克隆 H68.4, 13-6800；Invitrogen）在室温下应用 30 分钟，终浓度为 0.5 μg ml -1（1:1,000）。使用 Vectastain ABC Elite 山羊 HRP 试剂盒 (Vector Labs) 或连接有 HRP 标记的葡聚糖聚合物的 Dako Envision 山羊抗小鼠 IgG 二抗（K4001；Dako）分别针对 RRM2 和 TFR 完成抗
原检测。所有组织要么无色素，要么仅轻度黑化，因此不进行漂白，并且使用 Nova Red（Vector Labs）作为显色剂，以轻松辨别任何内源性色素的染色。然后用迈耶苏木精对切片进行复染色，然后在分级酒精、二甲苯中脱水并添加盖玻片。人扁桃体和结肠癌作为阳性测定对照。阴性对照由用非免疫混